公司新闻

NK细胞培养中细胞密度的控制

发布时间:2022-03-17 13:41:44 浏览量:1665

培养前PBMC投入密度

健康成年人的外周血PBMC量约为100万-200万个/ml,平均数量为150万个/ml。而NK细胞培养活化阶段,初始体积(培养基+因子+血浆)为60ml左右,起始密度为100-300万/ml,所需细胞总量为6000万-1.8亿,抽血量控制在50ml-70ml左右是合适的(根据个体差异)。

 

NK细胞培养过程中细胞密度的控制

1. NK细胞培养的密度下限为100万个/ml,上限为300万个/ml

2. 密度低于100万个/ml,细胞间隔距离远,细胞效应消失,活化效率低,增殖速度慢;密度高于250万个/ml,细胞间隔近,生长空间小,营养成分供应不足,也会影响增殖速度。

3. 最佳补液时机:当细胞密度增殖到150万-200万个/ml之间,根据公式当前细胞总量(单位个) ÷ 100万个 - 现有体积(ml) = 本次需补加培养基体积(ml),将补液后的细胞密度控制在100万个/ml。一般每隔48小时计数补液一次,直到培养基完全用光。

意义:每次补液后,维持细胞密度在100万个/ml,有利于细胞增殖效率最大化。在24-48小时之间,细胞数量翻倍增殖。

4. 如果计数后发现当前细胞密度达不到100万个/ml,建议48小时后再计数,细胞状态不好或有凋亡现象,立即补加2-5ml灭活自体血浆。

5. 细胞培养环境:99.99%纯度的二氧化碳:5%   温度:37℃。


公司名称:天津灏洋华科生物科技有限公司

天津市灏洋生物制品科技有限责任公司

版权所有:天津市灏洋生物制品科技有限责任公司

  • 保持联系

  • 联系电话: 02258921250
  • 联系邮箱: gx15822121119@163.com
  • 联系地址: 天津市西青区环外海泰华科一路15号润丰科技5幢1楼

备案号:津ICP备11000178号