在NK细胞培养中自体血浆升级处理方案
发布时间：2022-03-07 15:18:27 浏览量：6264
在免疫细胞培养时，需采集人外周血，分离血浆及PBMC，经过体外细胞因子及培养液的扩增，得到符合临床要求的免疫细胞。
灏洋实验室一直致力于为客户提供高品质的培养液产品及方案。在进行血浆处理时，添加钙离子可使促使血浆释放多种细胞因子，有利于淋巴细胞的培养。
Ø 操作方法
1. 获得人抗凝外周血或脐带血（50 ml以上），于2-4 h内进行分离操作。
2. 在高效离心管中加入15 ml样本密度分离液（TBD，货号HY2015），抗凝血（20-25 ml）缓慢加入至分离液上方，使之形成明显的分层界面。600 g慢升慢降离心30 min。
3. 用吸管小心从上至下分别取出血浆层、PBMC白环层。
4. 血浆中加入8%体积的葡萄糖酸钙溶液，反复冻融3次，离心去掉沉淀，上清液可用于细胞培养（对照组血浆56℃灭活30 min）。
5. 按照人NK细胞体外培养实验方案（TBD，货号TBDNK2013-S）继续培养。
Ø 实验结果
实验组NK细胞增殖数量相比对照组提高5%-10%。（平均数据）。
Ø 实验结论
建议客户处理血浆时，添加葡萄糖酸钙溶液，有利于NK细胞收获的质量。
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